CM-DiI(改良探針)與DiI(傳統探針)在透化和非透化處理樣本的效果比較:【來自文獻Staffend NA, et al. DiOlistic labeling of neurons in tissue slices: a qualitative and quantitative analysis of methodological variations.Front Neuroanat. 2011 Mar 1;5:14.】
1、未透化組織DiI&CM-DiI標記完整性的比較
結果顯示【見圖1&圖2】:兩種熒光探針(DiI和CM-DiI)標記組織的全細胞檢測顯示,不管是即刻觀察,還是2周后觀察,染料完整性和圖片質量都保持完整。對于樹突狀片段的結果染色結果一致。另外,通過分析樹突段的突棘密度來調查不同時間周期下染色穩定性和完整性。對于DiI標記的樹突段,不會時間段染色幾乎無差異。然而,CM-DiI標記的樹突段,突棘密度封片2周后明顯增強。
圖1(左). 非透化熒光染色組織的全細胞檢測。A)DiI標記組織封片后馬上檢測;B)DiI標記組織封片2周后熒光檢測;C)CM-DiI標記組織封片后馬上檢測;D)CM-DiI標記組織封片2周后熒光檢測;
圖2(右). 非透化熒光染色組織的樹突片段檢測。A)DiI標記組織封片后馬上檢測;B)DiI標記組織封片2周后熒光檢測;C)CM-DiI標記組織封片后馬上檢測;D)CM-DiI標記組織封片2周后熒光檢測;
2、透化組織DiI&CM-DiI標記完整性的比較
結果顯示【見圖3&圖4】:兩種熒光探針(DiI和CM-DiI)標記組織封片后即刻檢測,不論是全細胞還是樹突段,結果都無明顯差異;兩種熒光探針(DiI和CM-DiI)標記組織封片2周后檢測,不論是全細胞還是樹突段,CM-DiI標記的穩定性在熒光信號、光淬滅和zui終圖片質量上都強于DiI。
不管是即刻觀察,還是2周后觀察,染料完整性和圖片質量都保持完整。對于樹突狀片段的結果染色結果一致。另外,通過分析樹突段的突棘密度來調查不同時間周期下染色穩定性和完整性。對于DiI標記的樹突段,不會時間段染色幾乎無差異。然而,CM-DiI標記的樹突段,突棘密度封片2周后明顯增強。
圖3(左). 透化熒光染色組織的全細胞檢測。A)DiI標記組織封片后馬上檢測;B)DiI標記組織封片2周后熒光檢測;C)CM-DiI標記組織封片后馬上檢測;D)CM-DiI標記組織封片2周后熒光檢測;
圖4(右). 透化熒光染色組織的樹突片段檢測。A)DiI標記組織封片后馬上檢測;B)DiI標記組織封片2周后熒光檢測;C)CM-DiI標記組織封片后馬上檢測;D)CM-DiI標記組織封片2周后熒光檢測;
溫馨提示:對于不經透化處理的樣本,只需用傳統的細胞膜熒光探針如DiI染色即可。對于后續需透化處理的樣本,推薦用改良探針如CM-DiI(貨號:MX4007-50UG)進行染色。
產品訂購信息:【現貨提供,懋康生物整理和提供,*】
貨號 | 產品名稱 | Ex/Em (nm) | 規格 | 價格(元) |
MX4007-50UG | Celltracker CM-DiI 活細胞示蹤劑CM-DiI(紅色) | 553/570 | 1×50μg | 340.00 |
MX4007-250UG | Celltracker CM-DiI 活細胞示蹤劑CM-DiI(紅色) | 553/570 | 5×50μg | 1360.00 |
MX4002-10MG | DiI (橙紅色熒光探針) | 549/565 | 10mg | 398 |
細胞膜探針光譜和檢測濾片:
熒光探針 | zui大激發/zui大發射波長 (Ex/Em) | 濾光片編號 | |
Omeaga公司 | Chroma公司 | ||
DiI | 549/565nm | XF108, XF32 | 41002, 31002 |
CM-DiI | 553/570nm | XF32 | 31002 |