鼠尾膠原蛋白I 細(xì)胞培養(yǎng)
簡(jiǎn)要描述:
鼠尾膠原蛋白I 細(xì)胞培養(yǎng) ,膠原蛋白是結(jié)締組織和內(nèi)臟器官細(xì)胞外基質(zhì)的主要構(gòu)造成分,但在皮膚、肌腱、骨骼中分布較為廣泛。從遺傳和結(jié)構(gòu)上膠原蛋白分為許多類型。
產(chǎn)品時(shí)間:2024-03-19
Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾膠原蛋白I
搜索關(guān)鍵詞:
Extracellular Matrix (ECM) 細(xì)胞外基質(zhì);Gelatin 明膠;Collagen Type I 膠原蛋白I型;Poly-L-lysine 多聚L-賴氨酸;Fibronectin 纖連蛋白;Matrigel基質(zhì)膠; CAS:9007-34-5 ;
產(chǎn)品信息:
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾膠原蛋白I | MX0910-2ML | 2ml (10mg) | 450 |
Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾膠原蛋白I | MX0910-10ML | 10ml (50mg) | 2000 |
基本介紹:
膠原蛋白是結(jié)締組織和內(nèi)臟器官細(xì)胞外基質(zhì)的主要構(gòu)造成分,但在皮膚、肌腱、骨骼中分布為廣泛。從遺傳和結(jié)構(gòu)上膠原蛋白分為許多類型。膠原蛋白I(Collagen, Type I)是由2個(gè)α1鏈和1個(gè)α2鏈組成的異源多聚體,在37℃,中性pH下自發(fā)形成三螺旋骨架,是一種優(yōu)秀的細(xì)胞培養(yǎng)用基質(zhì),廣泛用于肝細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、脊神經(jīng)節(jié)、肌肉細(xì)胞、施萬(wàn)細(xì)胞、胚肺細(xì)胞、上皮細(xì)胞和其他大量細(xì)胞系。還能用于研究細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、遷移以及發(fā)育過(guò)程中的組織形態(tài)發(fā)生。
懋康生物提供的鼠尾膠原蛋白I是根據(jù)Birkedal-Hansen方法,通過(guò)醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷suan氫二鈉沉淀等步驟制備??捎糜诎患?xì)胞培養(yǎng)器皿,培養(yǎng)細(xì)胞表面粘附性,特別適合那些在普通培養(yǎng)器皿表面不易貼壁的細(xì)胞,比如成纖維細(xì)胞、肝細(xì)胞等原代細(xì)胞。還可用于三維膠的制備,模擬真實(shí)的生長(zhǎng)環(huán)境,使得細(xì)胞在三維環(huán)境中生長(zhǎng)。
本品為溶于6mM HAc的無(wú)菌溶液,濃度5mg/ml,每個(gè)批次產(chǎn)品皆通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試(包括三維空間培養(yǎng))以保證質(zhì)量的可靠性。
注意事項(xiàng)
整個(gè)操作請(qǐng)于冰上進(jìn)行,因室溫鼠尾膠原I可迅速成膠,操作過(guò)程盡量保持低溫。
整個(gè)操作請(qǐng)?jiān)跓o(wú)菌環(huán)境下無(wú)菌操作,避免污染以影響細(xì)胞生長(zhǎng)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被
組織培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度為1-5µg/cm2,起始濃度可首玄5µg/cm2。建議根據(jù)具體細(xì)胞類型來(lái)優(yōu)化。
1.1 6mM HAc稀釋液的制備
本品以溶于6mM HAc(=0.36g/L HAc)的無(wú)菌溶液形式提供,本身不溶于中性pH,建議用6mM HAc溶液做進(jìn)一步稀釋。
配制方法:取34.5µl 冰醋酸(17.4 M)加入100ml雙蒸水,充分混勻后即得到6mM HAc溶液,0.22µm濾膜過(guò)濾除菌后待用。
1.2 包被步驟
a,根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)體系以及優(yōu)化后的包被濃度來(lái)計(jì)算所需的膠原蛋白量,并加入相應(yīng)孔內(nèi),確保膠原蛋白溶液*覆蓋表面。
以包被濃度為5µg/cm2,先用6mM HAc稀釋液將膠原蛋白(5mg/ml)稀釋到合適的中間濃度,如50µg/ml,
然后參考表1 不同培養(yǎng)皿內(nèi)膠原蛋白加量表 來(lái)加量到各孔內(nèi);
以包被濃度為2µg/cm2,先用6mM HAc稀釋液將膠原蛋白(5mg/ml)稀釋到合適的中間濃度,如12µg/ml,然后參考表1 不同培養(yǎng)皿內(nèi)膠原蛋白加量表來(lái)加量到各孔內(nèi);
表1 不同培養(yǎng)皿內(nèi)膠原蛋白加量表
培養(yǎng)皿類型 | 每孔/皿表面積(cm2) | 當(dāng)包被濃度:2µg/cm2,中間稀釋濃度:12µg/ml,加入該稀釋液的體積(µl) | 當(dāng)包被濃度:5µg/cm2,中間稀釋濃度:50µg/ml,加入該稀釋液的體積(µl) |
96 well | 0.3 | 50 | 30 |
24 well | 1.9 | 300 | 190 |
12 well | 3.8 | 600 | 380 |
6 well | 9.5 | 1580 | 950 |
35mm | 8 | 1330 | 800 |
60mm | 21 | 3500 | 2100 |
100mm | 55 | 9170 | 5500 |
b,室溫孵育1h,小心吸掉多余液體,用無(wú)菌PBS清洗3~4次后直接使用?;蛘呒油昴z原蛋白溶液后,在超凈臺(tái)內(nèi)開(kāi)蓋過(guò)夜晾干。無(wú)菌條件下,包被好的器皿在4-25℃至少可保存3個(gè)月。
2. 三維膠原的制備
當(dāng)鼠尾膠原蛋白I使用濃度>1mg/ml,pH 7.0左右皆可形成具有一定強(qiáng)度的三維膠,建議成膠濃度為1-2 mg/ml。
由于本品是以溶于6mM HAc的無(wú)菌溶液形式提供,在成膠過(guò)程需先加入0.06倍體積的0.1M NaOH中和。
2.1 需要溶液準(zhǔn)備(無(wú)菌、預(yù)冷)
2.2 三維膠原制備(不含細(xì)胞)(以配制1ml,1mg/ml三維膠為例):
2.3 三維膠原制備(含細(xì)胞)(以配制1ml,1mg/ml三維膠為例):
相關(guān)產(chǎn)品:
MX0910-2ML | Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾膠原蛋白I | 2ml(10mg) |
MX0911-100G | Gelatin, Type A 明膠(A型) | 100g |
MX0917-25MG | Poly-L-lysine (Mw 70,000-150,000) 多聚L-賴氨酸 | 25mg |
MX0918-25MG | Poly-L-lysine (Mw 150,000-300,000) 多聚L-賴氨酸 | 25mg |
MX0921-25MG | Poly-D-lysine (Mw 70,000-150,000) 多聚D-賴氨酸 | 25mg |
MX0918-25MG | Poly-L-lysine (Mw 150,000-300,000) 多聚L-賴氨酸 | 25mg |
MX0922-10MG | Poly-D-lysine (Mw 150,000-300,000) 多聚D-賴氨酸 | 10mg |
MX0926-1MG | Fibronectin from Human Plasma 人纖連蛋白 | 1mg |
MX0928-1MG | Laminin from Mouse EHS sarcoma 小鼠層粘連蛋白 | 1mg |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠(chéng)為信、合同守信"的經(jīng)營(yíng)理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾膠原蛋白I 細(xì)胞培養(yǎng)
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